Cách tối ưu hóa bộ lọc cho tai w88
tai w88 (Truyền năng lượng cộng hưởng Forster) là một hiện tượng xảy ra bằng cách sử dụng các cặp chất huỳnh quang gần, xác định các đặc điểm của các tương tác phân tử, protein-protein, theo không gian và thời gian Sự truyền năng lượng này gây ra năng lượng phát quang của chất huỳnh quang đầu tiên, trở thành chất hiến tặng, cho chất huỳnh quang thứ hai, trở thành chất nhận, tạo ra chất huỳnh quang thứ hai, khiến phát quang là chất nhận Tại thời điểm này, huỳnh quang của nhà tài trợ bị ức chế và huỳnh quang chấp nhận tăng lên
Để truyền năng lượng này xảy ra về mặt sinh học, các tế bào phải ở trạng thái nơi khoảng cách liên phân tử dưới 1-10nm Vật liệu huỳnh quang được sử dụng phải có sự chồng chéo đủ lớn cho phổ để gây ra sự truyền năng lượng hiệu quả Tuy nhiên, kết quả chồng chéo trong quang phổ chảy qua (SBT) có thể được xác định bởi phổ phát xạ của nhà tài trợ và người chấp nhận, và do đó cũng có thể là một vấn đề với các phép đo tai w88
Phát triển công nghệ hiệu chỉnh SBT là điều cần thiết để làm cho băn khoăn dễ sử dụng hơn và các ứng dụng linh hoạt hơn Các kỹ thuật điều chỉnh SBT, bao gồm phát triển phần mềm, công nghệ hiệu chỉnh và hình ảnh trọn đời huỳnh quang (FLIM), hiện đang được phát triển tốt, đạt đến khả năng cải thiện hơn nữa hiệu quả của tai w88 Tương tự, các công nghệ kính hiển vi như photon đơn, hai photon (đa âm), đồng tiêu và TIRF cũng đã đóng góp đáng kể vào sự đơn giản hóa và hiệu quả của các thí nghiệm tai w88
Ứng dụng này Lưu ý kiểm tra các khía cạnh vật lý và sinh học của tai w88 và cấu hình phần cứng xung quanh, và tóm tắt cặp chất huỳnh quang và thu nhận hình ảnh tối ưu, so sánh sự khác biệt và lựa chọn các bộ lọc quang học cần thiết cho các phép đo tai w88
Cấu hình bộ lọc & kính hiển vi
Các thành phần bộ lọc cần thiết cho thí nghiệm tai w88 không có nghĩa là đặc biệt đặc biệt Cũng như các ứng dụng kính hiển vi huỳnh quang khác, một tấm gương lưỡng sắc là cần thiết để tách phát xạ của nhà tài trợ với cả năng lượng phát xạ của nhà tài trợ và nhà tài trợ và người chấp nhận kích thích vật liệu huỳnh quang của nhà tài trợ Sự khác biệt từ các ứng dụng kính hiển vi huỳnh quang khác là nó đòi hỏi hai phát Một là cho vật liệu huỳnh quang chấp nhận, phát xạ tai w88 và cái còn lại là để các vật liệu huỳnh quang của người hiến tặng để điều chỉnh chảy máu đơn lẻ Về mặt chọn một bộ lọc cụ thể, nó có thể được sử dụng trong cùng một bộ lọc hoặc bộ riêng biệt, băn khoăn nếu vật liệu huỳnh quang phù hợp hoặc trong các ứng dụng phát quang đơn sắc khác
Quan trọng hơn trong lựa chọn bộ lọc là hiểu rõ về cấu hình vật lý của phần cứng kính hiển vi được sử dụng trong các thí nghiệm tai w88 Các vấn đề phát sinh do các biến thể thử nghiệm như đăng ký thời gian và hình ảnh Mặc dù thiết lập lý tưởng cho nghiên cứu tai w88 có thể là không thể hoặc phù hợp với tất cả các ngân sách của các nhà nghiên cứu, nhưng điều rất quan trọng là ít nhất phải hiểu các ưu và nhược điểm của các cấu hình phần cứng và bộ lọc có thể có
1 Phương thức Multiview
Lý tưởng nhất để quan sát và đo lường các tương tác protein-protein, các phân tử có tính chất không gian và thời gian quan trọng, là một thiết lập cho phép quan sát đồng thời năng lượng phát quang của các nhà tài trợ và chấp nhận Điều này đòi hỏi một thiết bị cho phép quan sát đồng thời các mẫu trên màn hình chia Các phụ kiện đa điểm như vậy được gắn trong kính hiển vi phía trước máy dò và thiết bị chứa một bộ lọc để tách phát thải của nhà tài trợ và chấp nhận thành hai hình ảnh
Nếu quan sát tai w88 được thực hiện theo cách này, hai biến thể quan trọng, "thời gian" và "đăng ký" sẽ bị xóa Trong một đơn vị được liên kết tốt, thời gian hình ảnh của nhà tài trợ và người chấp nhận là đồng thời và đăng ký hình ảnh phù hợp, cung cấp hình ảnh chồng chéo trong chế độ xem mẫu Sự khác biệt duy nhất giữa hai hình ảnh là một người sử dụng bộ phát chấp nhận, trong khi hình ảnh còn lại là hình ảnh thu được bằng cách sử dụng bộ phát của nhà tài trợ
2 Loại bánh xe phát
Nếu bạn không có phụ kiện đa điểm, điều tiếp theo bạn có thể nghĩ đến là một bánh xe phát tự động Trong phương pháp này, một khối bộ lọc/giá đỡ chứa một exciter của nhà tài trợ và gương lưỡng sắc được đặt bên trong kính hiển vi Mỗi bộ phát cho các vật liệu huỳnh quang của nhà tài trợ và chấp nhận được gắn trong một bánh xe phát chuyển tốc độ cao
Cấu hình phần cứng này cho phép thu thập năng lượng phát quang của nhà tài trợ và người nhận thời gian này có thể đạt được với sự chậm trễ chỉ 40-75msec (tùy thuộc vào nhà sản xuất và mô hình) bằng công nghệ máy dò bộ lọc và máy ảnh mới nhất Đăng ký thay đổi do thay đổi thời gian trong chuyển động mẫu và công cụ trong quá trình chụp ảnh tế bào dương tính, mặc dù gần như không đáng kể, khi phân tích kết quả thử nghiệm
3 Phương pháp khối lọc riêng lẻ
Phương pháp thứ ba này có thể được sử dụng để thu thập huỳnh quang của người hiến và chấp nhận khác nhau, nhưng bị ảnh hưởng nặng nề bởi việc đăng ký hình ảnh và các biến thể thời gian được đề cập ở trên
Không giống như các mô hình cũ hơn, hầu hết các kính hiển vi hiện đại đều có tháp pháo tự động làm tính năng tiêu chuẩn, do đó, sử dụng kính hiển vi như thế này có thể giảm thiểu đáng kể các biến thể thời gian Sau đó, bằng cách căn chỉnh các bộ lọc trong dung sai của khối, bạn có thể cung cấp nhiều chỗ cho các lỗi đăng ký hơn hai phương pháp khác Sự thay đổi về thời gian và độ phân giải vốn có trong phương pháp thứ ba này phải được chú ý đặc biệt khi sử dụng các kỹ thuật nhạy cảm về mặt không gian và thời gian như tai w88
cặp huỳnh quang (cặp tai w88)
Trong khi các cặp tai w88 như CFP/YFP thường xuất hiện trong tài liệu khoa học và đã cung cấp cơ sở cho sự thành công của nghiên cứu tai w88 mới nhất, các protein huỳnh quang mới như Midoriishi Cyan và Kusabira Orange cũng đã được phát triển để nghiên cứu tai w88 Các quy trình tinh chế, kỹ thuật điều chỉnh tỷ lệ và các ứng dụng kính hiển vi tối ưu cho tai w88 đã được khuyến khích mạnh mẽ để phát triển các vật liệu huỳnh quang như vậy
基本的なレベルでtai w88ペアが成功するかどうかはその光学特性に注目します。まず選択的なドナーの刺激に対し励起スペクトルが十分に分離していることが必要です。第二にドナーの発光とアクセプタの励起の間に十分なエネルギー遷移が行なわれるための十分なオーバーラップ（>30%) phải được Thứ ba, phổ phát xạ của nhà tài trợ và người chấp nhận đủ cách xa nhau để có thể thu thập được huỳnh quang của từng vật liệu huỳnh quang
Sự phát triển của protein huỳnh quang mới sẽ tập trung vào việc liệu chúng có đáp ứng các tiêu chí này hay không và kết hợp các protein khác nhau với các phân tử sinh học để tạo ra màu sắc mới và vật liệu huỳnh quang Đối với những phát triển mới nhất, vui lòng tham khảo các liên kết và tài liệu dưới đây
Bộ lọc tai w88
Các sản phẩm trong danh mục này bao gồm các cặp tai w88 phổ biến nhất cho sự chú ý được phát triển và thu hút gần đây Các cặp tai w88 được liệt kê với biểu đồ rất dễ sử dụng bộ lọc bằng hệ thống bánh xe phát Bộ này bao gồm một exciter cho các vật liệu huỳnh quang của nhà tài trợ và một tấm gương lưỡng sắc, và một bộ phát cho thuốc thử huỳnh quang của nhà tài trợ và người chấp nhận Các số mô hình cho các bộ lọc của nhà tài trợ và người chấp nhận cũng được liệt kê, vì vậy bạn cũng có thể mua các bộ lọc riêng lẻ tùy thuộc vào cấu hình thiết lập phần cứng của bạn Nếu bạn đang mua các bộ lọc riêng lẻ, không sử dụng gương exciter và dichroic trong bộ bộ lọc chấp nhận
Khi đặt hàng bộ lọc cho tai w88, vui lòng đảm bảo cung cấp chi tiết phần cứng và thông tin gắn kết liên quan